У крові кролів багато базофілів (від 4 до 12 %). Непрямий тест ставиться на ізольованих базофілів кроликів. Кров з гепарином, взята з вушної вени кролика, центрифугируется у вузьких пробірках протягом 5 хв зі швидкістю 300 об/хв. Потім відсмоктується білувата лейкоцитарна плівка, яка утворюється між плазмою та еритроцитами. Попередньо готуються предметні скельця з барвником, для чого на предметне скло наносять краплю 0,3 % спиртового розчину нейтрального червоного. На сухий барвник наносять краплю (0,05 мл) сироватки хворого, краплю базофильной плівки (кроляча) і краплю алергену. Паралельно ставлять контролі з алергеном без сироватки хворого і із сироваткою, але без алергену. Предметне скло після обережного помішування суміші накривають покривним і підраховують базофіли. Про результати реакції судять за кількістю дегранулированных базофілів (під мікроскопом при ув. 600). Підраховують 20 або 40 клітин в різних полях зору. З них враховують число змінених базофілів. Результат виражається у відсотках. При показнику більше 10-15 % тест вважається позитивним. Відсоток дегранулированных базофілів у контролі не повинен перевищувати 2-3 %.
Позитивна реакція свідчить про наявність підвищеної чутливості до того чи іншого алергену, а негативний результат не виключає її.
Тест дегрануляції тучних клітин сполучної тканини. При виконанні тесту Шеллі доводиться стикатися з низкою труднощів: отримання хорошої лейкоцитарної плівки, взяття крові у одного і того ж кролика не частіше 1 рази в тиждень, нестійкість базофілів, схильність до спонтанної деструкції. У зв'язку з цим останнім часом все ширше застосовується тест з огрядними клітинами щури.
Для проведення дослідження необхідно одержати суспензію опасистих клітин. Интактная щур забивається шляхом обезголовлювання. Внутрішньочеревно вводиться 5-7 мл ізотонічного розчину натрію хлориду або розчину Тироде, підігрітого до 37 °С. Проводиться легкий масаж черевця протягом 15 хв. Потім черевна порожнина розкривається і вміст її стікає в пробірку, нагріту до 37 °С і змочену гепарином. Отриману суспензію, що містить гладкі клітини, необхідно тримати в термостаті при 37 °С весь час дослідження.
До початку досвіду, який ставиться аналогічно тесту Шеллі, необхідно подивитися 1 препарат (суспензія тучних клітин, нанесену на попередньо пофарбовану нейтральним червоним предметне скло) під мікроскопом. Якщо в препараті багато спонтанно дегранулированных тучних клітин, то огрядні клітини цієї щури використовувати досвід не можна.
Оцінка тесту виробляється, як в попередньому тесті (Шеллі) за відсотком змінених тучних клітин, але підраховується більшу кількість клітин (50-100). Позитивним вважається тест більше 10 %, при відсутності деструкції в контролях (0-3 %).
В протилежність попередньому існує тест гальмування прямий дегрануляції опасистих клітин.
Цей тест ставиться з огрядними клітинами щури, попередньо сенсибілізованими. У реакції беруть участь сенсибілізовані огрядні клітини перитонеальній рідині щурів, досліджувана сироватка і алерген.
Суспензія сенсибілізованих опасистих клітин наносять на заздалегідь забарвлене нейтральним червоним предметне скло, додають краплю (0,05 мл) специфічного алергену. Виходить прямий тест дегрануляції опасистих клітин. Реакцію читають через 10-15 хв стояння в термостаті. Підраховують відсоток дегранулированных клітин. Далі беруть серії предметних стекол, на кожне з яких завдають одне з розведень досліджуваної сироватки, краплю алергену і краплю сенсибілізованих опасистих клітин щура. Підраховують відсоток дегранулированных клітин. Результати порівнюють з попередніми даними (прямого тесту). За титр беруть розведення сироватки хворого, здатне гальмувати дегрануляцію тучних клітин попередньо сенсибилизированного тварини.
